一、公司簡介
Reichert總部位于美國布法羅市,是一家極其卓絕并極具創(chuàng)新性的高科技企業(yè)。具有170余年研 發(fā)、設(shè)計及生產(chǎn)高級
光學(xué)儀器及分析儀器的歷史與經(jīng)驗,并在過去20年里給全球生命科學(xué)和藥物 研發(fā)等領(lǐng)域用戶提供靈敏和穩(wěn)健的
表面等離子體(Surface Plasmon Resonance, SPR)儀 器。僅在過去10年,采用Reichert公司SPR技術(shù)發(fā)表的高質(zhì)
量文獻多達數(shù)百篇。Reichert生命科 學(xué)業(yè)務(wù)部將繼續(xù)研發(fā)并生產(chǎn)靈敏準確、性價比高的SPR系統(tǒng),使全球研究
者可以探索并超越 分子間相互作用非標記檢測的極限。
Reichert總部位于美國紐約州布法羅市
獲取數(shù)據(jù)信息
圖1.Reichert SPR技術(shù)獲取數(shù)據(jù)信息
應(yīng)用領(lǐng)域
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濃度測定:可測定生物活性分子(蛋白、抗體、細胞因子、生物標志物等)及(小分子化合物、農(nóng)藥殘留、毒素等)準確濃度
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是否結(jié)合(Yes/No):可快速判斷分子間是否存在結(jié)合
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親和力測定(KD):可準確測定分子間從mM到pM范圍親和力
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動力學(xué)測定(KD, Ka, Kd) :通過實時動力學(xué)方式提供分子間結(jié)合快慢信息,除了提供親和力信息外,還可呈現(xiàn)結(jié)合常數(shù)和解離常數(shù)
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熱動力學(xué)分析( △H,△S):熱動力學(xué)分析可提供分子間結(jié)合深層次機理,判斷焓驅(qū)動或熵驅(qū)動結(jié)合,有助于藥物創(chuàng)新設(shè)計
應(yīng)用類型
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蛋白-蛋白/核酸/糖/脂/小分子相互作用
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完整細胞-分子相互作用
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抗體-抗原相互作用
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抗體篩選,表位篩選
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疫苗、納米材料、聚合物
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脂質(zhì)體(Liposome)、外泌體(exosomes)、病毒、病毒樣顆粒(VLPs)
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熱動力學(xué)分析 (△H & △S)
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活性濃度分析
樣品類型
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常規(guī)樣品:如蛋白、核酸、小分子、細胞上清、細胞裂解液上清等
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完整細胞:可研究蛋白與完整原核及真核細胞、以及膜性成分(包括細胞膜)之間相互作用
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血液:直接檢測血液樣品,減少處理步驟,排除純化過程對樣品的影響
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細胞裂解液、噬菌體、膠體金顆粒、納米材料等
應(yīng)用案例
圖2. 大分子相互作用(HSA與anti-HSA相互 圖3. 小分子相互作用(CAII與95Da小分
作用) 子Methanesulfonamide相互作用)
kon=1.77×105M-1s-1,koff=1.17×10-3s-1, kon = 3.92 ×102 M-1s-1,
KD=6.62nM koff = 2.56×10-1 s-1,KD = 652 μM
圖4. SPR-熒光顯微鏡聯(lián)用(HEK細胞與纖維 圖5. DNA( T-bulge)與鋅指復(fù)合物相互作用
原蛋白相互作用) kon=4.68×103M-1s-1,
kon1 = 2.4 ×103 M-1s-1,koff1 = 8.5×10-3 s-1, koff=1.7×10-1s-1,
KD1 = 3.54 μM;kon2 = 9.7×103 M-1s-1, KD=36.4μM
koff2 = 2.5×10-4 s-1,KD2 = 26.4 nM
圖6. 植物蛋白相互作用(植物蛋白TWD1 圖7. 酶抑制劑的熱動力學(xué)研究(4-CBS與
與生長素轉(zhuǎn)運抑制劑NPA相互作用) CAII在20℃(藍線)及35℃(紅線)結(jié)合
KD=105μM 的溫度依賴信號曲線,ΔH為-6.0kcal/mol 。
圖8. 納米顆粒相互作用(納米金顆粒修 圖9. 納米顆粒相互作用(AP1修飾的
飾的多肽與其抗體相互作用) 納米籠狀顆粒與IL-4的相互作用)
kon=6.9×106M-1s-1 kon=5.25×105M-1s-1 koff=1.55×10-4s-1,
KD=0.30nM
圖10. SPR-電化學(xué)聯(lián)用(電壓對生物素標 圖11. 化學(xué)溶液研究(CaCl2溶液對羧甲基
記的短肽與鏈霉親和素相互作用的影響) 纖維素吸附的影響)
圖12A. 細菌相互作用(通過細菌特異 圖12B. 細菌相互作用(分析菌落生長數(shù))
性抗體捕獲細菌)
直觀易用的軟件
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數(shù)據(jù)分析處理:動力學(xué)分析曲線擬合至少5種模型可選:1:1model,1:2model,2:1model, mass transport model,2-state model等
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數(shù)據(jù)分析可采用結(jié)合速率或結(jié)合信號,實驗數(shù)據(jù)也可直接導(dǎo)入其他專業(yè)數(shù)據(jù)分析軟件如Scrubber,Clamp,TraceDrawer等,分析結(jié)果支持多種輸出格式,Excel,JEPG等
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數(shù)據(jù)采集和顯示:數(shù)據(jù)采集軟件可用于實驗方法創(chuàng)建、保存和運行,并能自動化控制檢測模塊、進樣器、注射泵等,可自行計算非常規(guī)溶劑或現(xiàn)行緩沖液的溫度系數(shù),精確控制樣品倉溫度和樣品檢測溫度,實現(xiàn)長時間無人值守自動化檢測,按照實驗要求完成熱動力學(xué)檢測等,檢測過程中實時顯示所有步驟曲線
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支持監(jiān)管法規(guī)環(huán)境,符合GxP和21 CFR Part 11
種類豐富的各種芯片
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傳感器芯片:≥12種,包括裸金芯片、固定生物素化ligand芯片、固定脂質(zhì)體的芯片、捕獲細胞的芯片、特殊的捕獲芯片以及客戶自定義芯片
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具有捕獲標記生物素的SA芯片和對應(yīng)試劑盒
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捕獲帶His標簽蛋白的NTA芯片
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具有捕獲細胞的芯片
靈敏度高,數(shù)據(jù)可靠
ReichertSPR可為藥物研究、藥物發(fā)現(xiàn)、抗體篩選、蛋白結(jié)構(gòu)/功能、基因調(diào)控及系統(tǒng)生物學(xué)研究等提供至關(guān)重要的定量信息,可提供如下高質(zhì)量、高可信度數(shù)據(jù):
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嚴謹?shù)膭恿W(xué)分析,結(jié)合速率/解離速率-影響治療性候選分子適用性及劑量的生物學(xué)學(xué)位重要指標。
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親和力范圍從極弱到極強(1mM到1pM)。使得研究細微和強效生物學(xué)通路以及更多療法選擇成為可能。
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極低的噪音和基線漂移,噪音水平0.05μRIU(RMS),基線漂移0.1μRIU/分鐘。
可選擇升級特殊流路,拓展應(yīng)用
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默認配置標準流路,可滿足從小分子到細胞在內(nèi)的大多數(shù)應(yīng)用
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采用Reichert SPR具有的特殊流路拓展應(yīng)用能力:電化學(xué)流路、石英窗流路(可引入第二光源),在檢測SPR數(shù)據(jù)的同時研究興趣分子光化學(xué)變化或熒光屬性(兼容光學(xué)顯微鏡)、質(zhì)譜流路(用于鑒定結(jié)合到芯片表面的分子)。
獨特應(yīng)用
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電化學(xué)流路:流路中興趣分子可引發(fā)芯片表面的電化學(xué)變化,記錄SPR信號數(shù)據(jù)的同時進行SPR/電流分析、SPR/脈沖伏安法、SPR/循環(huán)伏安法,并可檢測聚合物的形成和其他新的應(yīng)用
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光化學(xué)/熒光流路:引入第二光源,在檢測SPR數(shù)據(jù)的同時研究興趣分子光化學(xué)變化或熒光屬性(兼容熒光顯微鏡)
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質(zhì)譜流路(SPR-MS):用于鑒定結(jié)合到芯片表面的興趣分子